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從輔料角度提高mRNA-LNP穩(wěn)定性的幾點(diǎn)考量

更新時(shí)間:2023-09-05   點(diǎn)擊次數(shù):1389次

除了基本的LNPs的成分、其他成分如緩沖劑、抗氧化劑、非還原性自由基清除劑(如乙醇)和金屬螯合劑都可用于提高LNPs的穩(wěn)定性。需要評(píng)估每種輔料在不同儲(chǔ)存條件下(低于0°C或高于0°C)提高LNPs穩(wěn)定性的程度。

1. 輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級(jí)別

為提高mRNA分子穩(wěn)定性,緩沖體系、糖類保護(hù)劑等輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級(jí)別,避免RNA酶污染導(dǎo)致mRNA分子降解。

2.Tris/Tris-HCl比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗

在0°C以下的儲(chǔ)存條件下,緩沖液的選擇是至關(guān)重要的,因?yàn)榱姿峋彌_液(用于Pfizer /BioNTech C*V*D-19疫苗)在冷凍條件下可能會(huì)導(dǎo)致pH值漂移高達(dá)3.5個(gè)單位,這可能會(huì)損害mRNA的穩(wěn)定性,而Moderna的C*V*D-19疫苗中使用的Tris/Tris-HCl緩沖體系可能具有更穩(wěn)定的效果,且TRIS緩沖液是一種已知的羥自由基清除劑。

此外,根據(jù)Moderna之前的報(bào)告,使用Tris可以有效清除體系中由于陽(yáng)離子脂質(zhì)氧化產(chǎn)生的醛類物質(zhì),避免醛類物質(zhì)與mRNA的堿基發(fā)生反應(yīng),從而顯著提升mRNA-LNP體系的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。

Pfizer /BioNTech的C*V*D-19疫苗在后續(xù)的變更中亦將其處方中的磷酸緩沖體系替換為了Tris/Tris-HCl緩沖體系(變更后6劑量規(guī)格處方如下)。上述信息說(shuō)明Tris/Tris-HCl緩沖體系比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗制劑。

3.糖類保護(hù)劑可防止脂質(zhì)納米顆粒聚合

在不同配方的mRNA-LNP穩(wěn)定性研究中,通過(guò)凍融循環(huán),均觀察到脂質(zhì)納米顆粒聚合和藥效喪失的情況,而添加蔗糖和海藻糖等保護(hù)劑可以防止顆粒聚合和藥效喪失。兩種臨床可用的LNP-mRNA疫苗均含有蔗糖作為凍/溶保護(hù)劑。

4.pH值應(yīng)保持在7~8之間

Schoenmaker等認(rèn)為,優(yōu)化初始配方的pH值對(duì)mRNA疫苗的穩(wěn)定性也至關(guān)重要,因?yàn)閙RNA的水解率高度依賴于pH值,mRNA在弱堿性環(huán)境中更穩(wěn)定。此外成品制劑的pH值也決定了mRNA-LNPs的穩(wěn)定性。Pfzer/BioNTech和Moderna的C*V*D-19疫苗都將成品的pH值保持在7到8之間

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